QIAGEN RNeasy Mini Kit

QIAGEN RNeasy Mini Kit

从细胞、组织或酵母中纯化至多100 μg的总RNA

RNeasy Mini Kit可从细胞、组织或酵母中快速纯化高品质RNA，硅胶膜RNeasy离心柱的结合能力达100 μg RNA。使用RNAlater RNA Stabilization Reagent或Allprotect Tissue Reagent可方便的稳定组织样本，使用TissueRuptor或TissueLyser体系可有效的破碎组织。可在QIAcube全自动纯化仪上应用RNeasy Mini Kit实现RNA纯化自动化。处理更小或更大的样本，可使用RNeasy Micro Kit（离心柱结合能力为45 µg RNA）、RNeasy Midi Kit（离心柱结合能力为1 mg RNA）和RNeasy Maxi Kit（离心柱结合能力为6 mg RNA）。

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RNeasy Mini Kit适用于分子生物学应用。该产品不适用于疾病的诊断、预防或治疗。

QIAGEN RNeasy Mini Kit

产品详情

来自各种样品的高质量RNA。

甲醛琼脂糖凝胶和使用RNeasy Maxi Kit纯化的总RNA的Northern印迹。每个泳道上样的是从每种来源分离出的总RNA（10 µg）。所有组织均来自小鼠。酵母：酿酒酵母；大肠杆菌菌株：HB101。^32个P标记的探针被识别为（G）GAPDH；（E）翻译延伸因子EF-1α；（O）外膜蛋白A序列。（E和O分别由瑞士巴塞尔大学的P. Philippsen和德国图宾根的马克斯·普朗克生物学研究所的U. Henning分别提供。）未检测到枯草芽孢杆菌。中号：0.24-9.5kb RNA阶梯。胚胎，Huh7和HeLa细胞泳道中的7.5 kb带（指示）是核前体RNA。

性能

RNeasy Mini Kit可从至多30 mg动物或人类组织样本，或从100–1 x 10⁷个动物或人类细胞样本或酵母中纯化总RNA（参见"RT-PCR of RNA from as few as 100 cells"和"High-quality RNA from a variety of samples"）。

原理

RNeasy Mini Kit可从少量的样本中高效纯化总RNA。

程序

RNeasy Mini Kit可从10–1 x 10⁷个动物或人类细胞中、0.5–30 mg动物或人类组织中或小于5 x 10⁷个酵母细胞中方便的纯化总RNA。先对样本进行破碎和匀浆。在裂解物中加入乙醇以提供合适的结合条件。然后将裂解物上样至RNeasy硅胶膜（参见"RNeasy Mini spin column"）。RNA结合到膜上（多可结合100 µg），污染物被高效洗去。对于某些对少量DNA十分敏感的RNA应用，可在RNeasy操作过程中进行柱上DNA酶处理，去除DNA残留。之后可在30–100 µl的纯水洗脱液中得到高浓度的纯化RNA（参见"RNeasy Mini procedure"）。还有各种特殊应用的实验方案可供选择。

应用领域

使用RNeasy技术纯化得到的RNA的A_260/280比为1.9–2.1（10 mM Tris­·Cl、pH 7.5的溶液中），适用于多种下游应用，包括：

• Northern印迹、点印迹和狭缝印迹

• 终点式RT-PCR

• 定量real-time RT-PCR

• 芯片分析

• Poly A+ RNA筛选

技术指标