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纯化磁珠的工作原理及纯化方法

更新时间:2023-03-22      点击次数:2555
  纯化磁珠是一种用于纯化生物样品的新型材料。它可以通过磁性吸附的方式快速、高效地从混杂的生物样品中分离出目标分子,如蛋白质、DNA或RNA等。
  
  纯化磁珠的工作原理:
  
  工作原理是基于磁性吸附技术。所谓磁性吸附,即是利用磁性微粒的磁性将目标分子吸附在磁珠表面,然后通过磁力将磁珠和吸附的分子分离出来,从而实现分离纯化的目的。
  
  制备:
  
  主要是由磁性微粒和作用于微粒表面的官能化试剂组成。通常采用配体、抗体、亲和素等官能化试剂对磁性微粒表面进行修饰,使其具有特异性识别和吸附目标分子的能力。
  
  制备的方法有多种,最为常用的就是交联反应法。具体方法是将磁性微粒和交联剂混合,在水溶液中反应,生成交联磁性微粒,并用细胞孔径分离技术分离所得的交联磁性微粒,最后采用官能化试剂进行修饰。
  
  纯化方法:
  
  通常,纯化磁珠的纯化方法可以分为两种:手工操作和自动化操作。手工操作的方法较为简单,适用于小规模操作。自动化操作的方法则适用于大规模商业化生产。
  
  手工操作的纯化方法一般包括以下步骤:
  
  1.磁珠预处理:将磁珠分散在缓冲液中,加入磁性分离架(磁珠分离器)静置5-10分钟,磁性分离架和磁珠之间的吸附力会使磁珠沉降到磁性分离架的底部;
  
  2.磁珠清洗:将磁性分离架和磁珠从混合物中移开,洗涤吸附在磁珠上的目标分子;
  
  3.磁珠复苏:用纯的缓冲液重悬沉淀下来的磁珠,从而得到目标分子从磁珠中脱离的纯化产品。
  
  在自动化操作的纯化方法中,通常采用毒理性较低、稳定性较高、流动性较好的磁珠,然后使用自动化纯化仪器对样品进行处理。这种方法具有大规模纯化的优点,但也需要专业人员进行操作和维护设备。
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