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细胞培养的相关知识分享

发布时间:2022-11-30      点击次数:269
  细胞培养技术又称单细胞分离培养技术,即在体外将一个细胞从细胞群中分离出来,使其能够复制成一个新的细胞群培养体系。由单个细胞形成的细胞群称为克隆,纯化后的细胞群称为细胞系,即细胞培养。
 
  各细胞的遗传和生物学特性非常相似和一致,有利于不同细胞群形态和功能的比较研究。
 
  菌落(克隆)计数:在倒置显微镜下观察、计数直径大于75μm或含有50个以上细胞的克隆。
 
  血细胞计数板细胞数/ml=4个大正方形细胞总数/4×104
 
  细胞计数器/细胞分析仪(凯西,德国)
 
  细胞活力0.4%台盼蓝染色
 
  MTT法可用于评价细胞的相对数量和活性
 
  细胞的冷冻保存和复苏:
 
  低温保存:4℃缓慢冷冻60分钟(可延长)
 
  -20℃下40-60分钟(不能太长,可以跳过*)
 
  -80℃(半年内转液氮/过夜)程控冷却仪表1-3℃/min转液氮
 
  复苏:38℃溶解,注意水面不能接触冻存管盖边
 
  上清液以低速(500转/分)离心除去,加入相同的培养基,轻轻吹扫上清液,接种于适当大小的培养瓶中。
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