您好!欢迎访问深圳艾维迪泰生物科技有限公司网站!
全国服务咨询热线:

18098992689

当前位置:首页 > 技术文章 > 让专业人士告诉你纯化磁珠的试验操作步骤

让专业人士告诉你纯化磁珠的试验操作步骤

发布时间:2022-03-07      点击次数:1423
 
  纯化磁珠适合于从各种PCR产物或酶促反应液中高通量快速地回收100bp~50kb的DNA/RNA的片段,回收效率高达80%。能有效地去除PCR产物或酶促反应液中的寡聚核甘酸、引物二聚体、盐、蛋白质等污染。
 
  纯化磁珠的操作步骤:
 
  自备试剂:
 
  洗涤液:85%乙醇;
 
  洗脱液:BufferEB(10mMTris-HCl,pH8.0)或去离子水(pH在7.0~8.0之间)。
 
  磁力架:(建议使用深圳艾维迪泰生物科技有限公司针对200μLPCR管磁力架,货号:BMB32-0.2)
 
  实验步骤:
 
  1.充分混合震荡磁珠,使管内磁珠完全均匀悬浮起来。
 
  2.向样品管(可使用200μLPCR管或96孔板)中加入待纯化的DNA样品溶液。
 
  3.取1.8×样品体积的磁珠溶液加入样品管中,漩涡震荡5秒后,室温静止结合5min。
 
  注:放置期间如出现磁珠沉降现象应及时颠倒或者旋窝混匀,以保证磁珠处于悬浮状态。
 
  4.将样品管置于磁力架上2min左右或待磁珠被磁力架装置完全吸附,保持样品管在磁力架上静止,用移液枪吸取上清并弃掉,操作过程中避免触碰到磁珠团。
 
  5.保持样品管在磁力架上,向管内慢慢加入300μL85%乙醇,保持样品管不离开磁力架以及磁珠团始终被吸附在管壁上,禁止分散开。
 
  6.将样品管置于磁力架上2min左右或待磁珠被磁力架完全吸附,保持样品管在磁力架上静止,用移液枪吸取上清并弃掉,操作过程中避免触碰到磁珠团。
 
  7.重复步骤5~6,将管内的液体全部吸除干净。
 
  8.将样品管从磁力架上取出,于室温放置3~5min,使残留乙醇充分挥发。
 
  注:避免真空干燥,磁珠过于干燥将会降低DNA/RNA洗脱效率。
 
  9.向管内加入20~100μL洗脱液,并用移液枪轻轻吹打5-10次,使磁珠重悬混匀,操作过程中应避免产生气泡。
 
  10.室温放置5min以充分洗脱。
 
  注:为了提高洗脱效率,放置期间如出现磁珠沉降现象应及时颠倒或者旋窝混匀,以保证
 
  磁珠处于悬浮状态。
 
  11.将洗脱样品管放回磁力架上2min或待所有磁珠都被磁力架装置完全吸附。
 
  12.小心地将洗脱上清转移到新的灭过菌的管子中,在转移过程不要碰到磁珠,如出现磁珠悬起现象请重复步骤11~12。
深圳艾维迪泰生物科技有限公司
地址:深圳市南山区桃源街道留仙大道1183号南山云谷创新产业园龙塘阁301-303
邮箱:18098992689@ewell.com.cn
传真:0755-26433092
关注我们
欢迎您关注我们的微信公众号了解更多信息:
欢迎您关注我们的微信公众号
了解更多信息
扫一扫访问手机站扫一扫访问手机站
访问手机站